Ambientada en la noche del 25 de febrero de 1964, One Night in Miami sigue a un joven e impetuoso Cassius Clay mientras sale victorioso del ring como el nuevo campeón mundial de boxeo de peso pesado. Contra todo pronóstico, derrota a Sonny Liston y conmociona al mundo del deporte. Mientras multitudes de personas salen a las calles en Miami Beach para celebrar la victoria, Clay -incapacitado para quedarse en la isla debido a las leyes de segregación de la era de Jim Crow- pasa la noche en el Hampton House Motel en el vecindario afroamericano de Overtown. El púgil se encuentra allí celebrando el éxito con tres de sus amigos más cercanos: Malcolm X, Sam Cooke y Jim Brown.
Durante esta noche histórica, estos cuatro íconos -que eran la representación misma del movimiento 'Black Power' y sintieron la presión social que traía su cruzada- compartieron sus pensamientos entre ellos sobre sus responsabilidades como personas influyentes. Han de ayudar a que el país avance hacia la igualdad y el empoderamiento de los de su raza. A la mañana siguiente, los cuatro hombres amanecen decididos a definir un nuevo mundo para ellos y su comunidad.
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