Diego Márquez es un niño de ocho años que tiene a un jaguar como mascota y compañero llamado Baby Jaguar que le ayuda en su labor principal: rescatar a animales malheridos o que se encuentran en problemas. Diego es el primo mayor de la famosa Dora la Exploradora, que aparece a veces en la serie. Además de su jaguar, Diego también cuenta con la ayuda de su hermana Alicia de 13 años, una experta en ordenadores y que es bilingüe. Alicia se encarga de diseñar el rescate de los diversos animales y de cuidar de us hermano pequeño además de conducir una moto con la que pueden desplazarse. Los padres de Diego son científicos y tienen tres hijos: Alicia, Diego y otra hermana mayor que Alicia llamada Daisy de 18 años.
Cada vez que Diego escucha a un animal pedirle ayuda en su Centro de Animales él acude con ayuda de sus amigos y utensilios como su cámara que le permite saber dónde se encuentrra el animal en peligro o su bolso que puede convertirse en cualquier objeto.
En 'Go, Diego, Go!' se busca enseñar a los más pequeños aprender palabras en inglés mientras viven asombrosas aventuras de la mano de su protagonista.